过柱子请教
是这样的,做了一个产物,用EA:PE=1:2点板有三个点,最下边一个是产物点,三个点分的很开,然后装样过柱子,硅胶大概装了15cm,先EA:PE=1:8第一个点出来,然后1:7接着1:6,1:5过发现下面两个点都是一起出的,加压不加压都这样,请教如何解决下边两个点交叉的问题,很头痛啊。
回答:
没图不好说,看你要的点展得有多开,一般把你的点展到Rf值在0.2-0.5之间
那就不要梯度了,直接一比八慢慢过,极性还是大
什么极性
后面极性不要增大了
后面极性大了。你第1个点出来,肯定有点心急,加压不要随便加,要么一直加,要么一直不加,除非最后一个点或者 实在分不开急需处理
1:8的话,后面就不出点了,所以我才加大了极性,现在都1:3了,还是两个点
既然最下面一个是产物,前面两个点就不用费力纯化了,直接调到产物点Rf 0.2等度冲就行。你已经发现两个点重叠了,就不用再慢慢洗脱了,直接充下来重新过柱子
大概0.3左右,分的很开的
不增大,下不来啊,我也只能剃度过,总共里面产物估计有个500mg,现在都已经过了1l多溶剂了,还是两个点
洗脱剂极性变化太快。你可以用1:8的洗脱剂刷掉大部分杂质后再还洗脱剂极性。你的三个点RF值大概是多少
三次过柱子的比例和洗脱体系做了调整吗?硅胶柱的高度有没有加长?有没有试过中压柱?
我都重新过了3次了,一直都是这个现象,重叠了,很难分
试了一下二氯和石油醚,都一样
根据你的板子与你的爬板极性我建议你从1:10开始过第一个点出来直到消失。换1:6刷掉第二个点,直到第二个点变单或者消失。再换大极性刷产品点。如果粗品溶解性差可以给洗脱剂里加总体积10%DCM。试试。切记过柱子不能急,要有耐性。同时柱子要装的平整,一般柱效高度是样品的4-5倍高度。特别难过的要比这个还要高
极性越大,越是分不开啦。1:7,1:6都不会出吗?会出来就慢慢过,不要急
换成DCM:MeOH的体系试试
你这个不要太好分,两个点那么远
你不是过不开吗,换流动相过,我碰到过板上分的很开,但是过不开,换个流动相再过就分开了,当然也有分不开,直接刮大板的
既然板子分离很好,那就做制备板分离就好。