做过EDC/NHS反应的达人请进
想用EDC/NHS连接氨基和羧基，但是失败了。是5:2的EDC/NHS，EDC的量稍多于氨基的量，室温搅拌24h。请问这个反应成功的关键在什么地方呢？两种溶液是不是必须现配啊？还是因为这种形成的肽键不稳定，超声就会断裂吗？最好能帮忙给下经典的文献，谢谢大神们。
回答：
我也在做这个，请问EDC反应一定要用缓冲液吗？edc必须要先溶解之后，在加入反应液里吗？
有这么复杂吗……我做的就是先用四氢呋喃把酸和NHS溶解了，然后冰浴，分批加入EDC或者DCC，然后搅拌过夜，早上来了抽滤一下，然后旋蒸掉THF，加水固体产品就出来了……当然溶剂可以换成能溶解酸的其他溶剂，如DMF之类的文献也很多报道的，至于比例，我差不多都是1：1
先加EDC，EDC只是说在4-6有较高活性，不是说超过这个范围就没有活性l，活性较低而已。在pH7.4左右进行活化，EDC多一点，NHS可以相对少点。
EDC/NHS>=4:1, 先加EDC，反应10-15min，再加ＮＨＳ，应该效果不错的。
这个不是酯化反应，酯化反应是指羧基与羟基结合，形成酯键-CO-O-。这个叫酰胺键，是羧基与氨基的成键反应，-CO-NH-。
这个是具体反应过程。
想用EDC/NHS连接氨基和羧基，但是失败了。是5:2的EDC/NHS，EDC的量稍多于氨基的量，室温搅拌24h。请问这个反应成功的关键在什么地方呢？两种溶液是不是必须现配啊？还是因为这种形成的肽键不稳定，超声就会断裂吗 ...
酰胺键没那么脆弱的，不可能超声一下就断了。
最好不要用水做溶剂，而且这个反应最还在弱碱性条件下反应，有条件的话可以试一下edc/HOBt 还有dmap 多试几次就好了。想请教一下上面那个反应你做出来了吗？实验的溶剂、PH、反应物和EDC/NHS的用量可以告诉我一下吗？现在在做同样的反应，做了好久都没做出来，拜托拜托
你做的底物是用水溶液么？EDC和水会反应的，最好用有机溶剂如DCM，DMF什么的。一定要用水溶液的话应该先将酸、胺、催化剂（试试HOBt）溶解，再将EDC加入搅拌.
ph看你文献说明了，一般要加一点碱的。做不出来你就换DMF做溶剂试试请问引用的图片是那篇文章的呢？能不能把文章名字告诉我，我刚开始做这个反应不太懂，EDC/NH活化羧基和小分子伯胺反应，文献上说在0℃水体系反应，请问这个温度是不是太低啊，NHS我用盐酸盐，一定要用缓冲剂吗？
我在这也有一个小问题跟您请教一下，我现在做的纳米粒子表面是-COOH，想跟一个两端都是氨基的小分子反应，
在硼酸缓冲液中（PH 8.2），先加EDC 过会再加NHS，再过会加小分子 是这个顺序吗？
如何才能保证双氨基中有一个能被保留下来？
对于EDC NHS加入的时候PH有什么要求吗？没有加带氨基的分子，我是先做的活性酯，后面用活性酯进行缩合反应的。我当时旋蒸完差不多就只有固体。
都可以，当时做的纯度比较好，就用水洗处理了一下就直接反应了，但是如果纯度不够的话，可以进行适当的纯化。
很多文献用的0.1M，PH6.5的MES缓冲液，既然是缓冲液，里面就应该含水。而EDC在水溶液里面会生成溶于水的副产物，请问到时候怎么除去呢？