ADC（抗体偶联药物）研发中，Linker 的设计与合成质量直接决定药物的安全性与有效性。统计显示，Payload 与 Linker 的化学合成成本通常占整个 ADC 研发投入的 25–35%，而其中可被 Cathepsin B 酶切释放的 Val-Cit-PABC 体系是临床 ADC 采用最广泛的可裂解连接子——Adcetris（ Brentuximab vedotin）、Polivy（Polatuzumab vedotin）等重磅药物均基于此。

一、Val-Cit-PABC 为什么成为"金标准"

Val-Cit-PABC 连接子系统的三段式设计各有分工：

• Val-Cit 二肽：溶酶体组织蛋白酶 B（Cathepsin B）的特异性底物。Cathepsin B 在肿瘤细胞溶酶体中高表达，而在血浆中活性受抑制，从而保证"胞内释放、循环稳定"；

• PABC（对氨基苄醇）自牺牲间隔臂：二肽被酶切后，PABC 自发 1,6-消除，以未修饰活性形式释放载荷，避免载荷被"拖尾"修饰而失活；

• 前端连接基团（MC/SPDB/SMCC 等）：决定与抗体的偶联化学——MC（马来酰亚胺己酸）靶向半胱氨酸巯基，SPDB 二硫键响应肿瘤内还原环境，SMCC 硫醚键则提供最佳循环稳定性。

二、典型定制合成项目拆解

以 MC-Val-Cit-PABC-PNP carbonate（MMAE 偶联用活化中间体）为例，一个标准 5 g 定制项目包含：

逆合成分析：

目标产物：MC-Val-Cit-PABC-PNP carbonate
    ├── 片段 A：MC-Val-Cit-OH（马来酰亚胺-缬氨酸-瓜氨酸）
    │        ├── A1. 马来酰亚胺己酸（MC）
    │        ├── A2. Fmoc-Val-OH
    │        └── A3. 瓜氨酸
    └── 片段 B：PABC-PNP carbonate
             ├── B1. 对氨基苄醇
             └── B2. 二碳酸二叔丁酯/PNP 氯甲酸酯活化

关键工艺点：

1. 马来酰亚胺的水解控制：MC 片段在中性偏碱条件下易水解失活，缩合与脱保护步骤需严格控温控时，避免 Fmoc 脱除（哌啶条件）对马来酰亚胺的破坏——通常采用先脱保护后接 MC 的顺序，或将 MC 接入放在最后一步；

2. PNP carbonate 活化：PABC 苄醇用氯甲酸对硝基苯酯活化，需无水条件与惰性气氛，产物对水解敏感，纯化后建议充氮低温储存；

3. 手性氨基酸消旋控制：Val-Cit 缩合需选用低消旋化的缩合体系（如 HATU/HOAt 或 PyBOP），并通过 chiral HPLC 验证；

4. 纯度交付标准：HPLC ≥98%，附 NMR、HRMS、qNMR 定值。

三、模块化库：加速 linker 优选

固定 Cathepsin B 裂解臂，变化连接臂长度与偶联化学，是 DAR 值与药代动力学优化的常规策略。纳孚生物常备 Val-Cit-PABC 系列模块化库：

• 5 种间隔长度：PEG2、PEG4、PEG8、C4 烷基、C8 烷基；

• 3 种偶联臂：MC（半胱氨酸）、SPDB（二硫键）、SMCC（硫醚）；

• 均为 PNP 预活化形式，到货即可与 payload 偶联，省去活化步骤。

四、为什么选择定制合成服务商

自建 ADC linker 合成能力需要投入：高毒/敏感化合物操作设施、多肽合成经验、手性分析能力——对于早期筛选阶段的项目，定制合成是性价比更高的路径。纳孚生物提供从毫克级筛选量到克级放大的 linker-payload 定制合成服务，2–4 周交付，附完整质控包（HPLC/NMR/HRMS/qNMR）。

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纳孚生物 — 专业化合物定制合成与生物素标记服务商