角果木属Ceriops Arn. 植物是生长在热带、亚热带海岸潮间带的红树科（Rhizophoraceae）真红树植物^[1]。该属植物在全世界范围内有5个种，分别为角果木Ceriops tagal (Perr.) C. B. Robinson、十雄角果木C.decandra (Griff.) DingHou、澳洲角果木C. australis (White) Ballment, Smith et Stoddart、齐氏角果木C. zippeliana Blume 和拟十雄角果木C. pseudodecandra sp. nov. Sheue, Liu, Tsai et Yang^[2]。我国仅产1种，即角果木，主要分布于海南省^[3]。角果木具有消肿解毒、收敛止血的功效，在民间可做药用，用于恶疱、无名肿毒、虫蛇咬伤等症。还可用于溃疡久不愈、吐血、大便出血以及各种外伤出血^[4-6]。迄今为止，关于该属植物的化学成分研究主要集中在含量丰富的萜类化学成分，而微量的苯丙素类化合物鲜有报道。为了进一步丰富其化学结构的多样性，寻找具有良好生物活性的药用先导化合物，本实验对采自中国海南省的角果木进一步开展深入研究，从其醋酸乙酯部位中分离鉴定了8个化合物，分别为 (E)-3-(5-羟基-2,3,4-三甲氧基苯基)丙烯酸甲酯 [(E)-methyl-3-(5-hydroxy-2,3,4-trimethoxy-phenyl)acrylate，1]、tagalphenylpropanoidinA（2）、松柏醛（coniferyl aldehyde，3）、2,3-二甲氧基-5-(1-丙烯基)苯酚（2,3-dimethoxy-5-(1-propenyl) phenol，4）、丁香酸甲酯（methyl syringate，5）、丁香醛（syringaldehyde，6）、银松素甲醚（pinosylvin monomethyl ether，7）、棕榈酸（n-hexadecane acid，8）。其中，化合物1为新的苯丙素类化合物（图1），命名为角果木苯丙素C；化合物4～8为首次从该植物中分离得到。

1  仪器与材料

柱色谱硅胶（青岛海洋化工厂，100～200目、H硅胶）；薄层色谱硅胶（青岛海洋化工厂，H硅胶）；C₁₈反相ODS（日本YMC公司）；C₁₈色谱柱（日本YMC公司，250 mm×10 mm，5 μm，半制备型；250 mm×4.5 mm，5 μm，分析型）；半制备型Alltech高效液相色谱仪（426泵）和UV-Vis200型紫外检测器（美国Alltech公司）；AVANCE III 400型核磁共振波谱仪（美国Bruker公司）；Waters Xevo G2 Q-TOF质谱仪（美国Waters公司）；P-1020型旋光测定仪（日本JASCO公司）；V-550 UV/VIS型紫外分析仪（日本JASCO公司）；FT/IR-4600型红外光谱仪（日本JASCO公司）；色谱纯乙腈、甲醇（德国Merck公司）；其他常规试剂为北京通广精细化工公司分析纯试剂，均重蒸。

海南红树角果木枝条于2017年3月采集于中国海南红树林湿地，由暨南大学药学院李敏一副教授鉴定为角果木Ceriops tagal (Perr.) C. B. Robinson的枝条。样品标本（20170329）保存于暨南大学药学院。

2  提取与分离

将角果木枝条晾干、粉碎成粗粉，称定13 kg，用95%乙醇室温提取5 次（60 L/次），每次提取2 d，过滤后合并滤液，减压浓缩得总浸膏950.9 g。将总浸膏分散于水中后，依次加入石油醚和醋酸乙酯分别萃取3～5次（10 L/次），将各部分分别合并，减压浓缩后分别得到石油醚部位26.3 g，醋酸乙酯部位385.2 g。

醋酸乙酯部位加入1.2～1.5倍量的柱色谱硅胶（100～200目）拌样后，经正相硅胶（100～200目）柱色谱分离，氯仿-甲醇（100∶1→5∶1）梯度洗脱，经TLC检识和HPLC分析后，合并相同组分，得到9 个流分（Fr. A～I）。

Fr. B流分经硅胶柱色谱，（石油醚-醋酸乙酯30∶1）等度洗脱，得到8个子流分（Fr. B1～B8）。Fr. B5（480.3 mg）经反复硅胶柱色谱（石油醚-丙酮15∶1）纯化得到化合物4（2.3 mg）。

Fr. D流分通过硅胶柱色谱，用石油醚-醋酸乙酯（15∶1→0∶1）为洗脱剂进行梯度洗脱，分成12个子流分（Fr. D1～D12）。Fr. D8（1.88 g）经反相ODS柱色谱分离，丙酮-水（30∶100→100∶0）梯度洗脱，得到20个子流分（Fr. D8-1～D8-20）和化合物8（6.8 mg）。Fr. D8-6（371.2 mg）经TLC制备板制备，得到化合物7（113.3 mg）；Fr. D8-8经半制备高效液相色谱分离，甲醇-水（53∶47，2 mL/min）为流动相，检测波长283 nm，分离得到化合物1（8.4 mg，t_R＝39.1 min）和2（2.0 mg，t_R＝50.6 min）。

Fr. D9（664.9 mg）经正相硅胶柱色谱分离，用石油醚-醋酸乙酯（4∶1→0∶1）为洗脱剂进行梯度洗脱，分成9个子流分（Fr. D9-1～D9-9）。Fr. D9-4经半制备高效液相色谱分离，甲醇-水（53∶47，2 mL/min）为流动相，检测波长283 nm，分离得到化合物3（2.0 mg，t_R＝11.2 min）和5（3.4 mg，t_R＝12.6 min）。

Fr. D10流分经正相硅胶柱色谱，环己烷-丙酮（5∶1→0∶1）以及重结晶得到化合物6（86.4 mg）。

3  结构鉴定

化合物1：淡黄色油状物，易溶于丙酮、氯仿和甲醇。(nm): 223, 294；(cm⁻¹):   3 432, 2 943, 2 361, 2 335,1 708, 1 462, 1 197, 1 111。由HR-ESI-MS知准分子离子峰m/z 267.086 9 [M－H]⁺（计算值267.086 9），由此确定其相对分子质量为268，分子式为C₁₃H₁₆O₆，不饱和度为6。

¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) 谱中，低场区显示有3个烯（或芳香）氢质子信号，其中包括1组反式双键的信号δ_H 6.37 (1H, d, J = 16.2 Hz)和7.89 (1H, d, J = 16.2 Hz)；1个芳香单质子信号δ_H 6.88 (1H, s)；氢谱有4个明显的甲氧基氢信号δ_H 3.80 (3H, s), 3.83 (3H, s), 3.92(3H, s), 4.00 (3H, s)，说明结构中存在1个五取代的苯环。核磁数据（表1）显示该化合物有1个酯羰基 (δ_C 167.8 qC) 和1个双键 (δ_C 118.2 CH；δ_C139.2 CH)，以及五取代的苯环的6个碳信号，据此推测该化合物是1个苯丙素类化合物，其核磁数据与tagalphenylpropanoidinA（化合物2）相似。

在HMBC谱图（图2）中，H-6与C-2、C-4和C-7，H-7与C-2、C-6和C-9以及H-8与C-1和C-9均存在相关信号，可以推断出化合物1的骨架为1-丙烯酸酯-2,3,4,5-四取代苯，符合不饱和度的计算值，表明化合物1是苯丙酸的衍生物。在HMBC谱图中，还可以明显观察到，第1个甲氧基δ_H 3.80 (3H, s)与C-9有相关信号；第2甲氧基δ_H 3.83 (3H, s) 与C-2有相关信号；第3个甲氧基δ_H 3.92 (3H, s) 与C-3有相关信号，第4甲氧基δ_H 4.00 (3H, s) 与C-4有相关信号。由此，可确定4个甲氧基的取代位点。

该化合物是平面刚性结构，与化合物2的区别在于C-3，5位的取代基。根据化合物1的HMBC谱（图2）上3-OCH₃/C-3和H-6/C-5的相关信号，再结合相对分子质量信息，可以判断出5位的取代基是-OH，最终证实以上结构推断。综上所述，化合物1被鉴定为 (E)-3-(5-羟基-2,3,4-三甲氧基苯基)丙烯酸甲酯，经各数据库检索确定其为新化合物，命名为角果木苯丙素C。

化合物2：淡黄色油状物，易溶于丙酮、氯仿和甲醇。(nm): 230, 203；(cm⁻¹):   3 287, 1 670, 1 598, 1 512,1 459, 1 329, 1 103。HR-ESI-MS m/z: 269.102 8 [M＋H]⁺，267.087 1 [M－H]^－，表明该化合物的相对分子质量为268，分子式为C₁₃H₁₆O₆。¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ: 7.90 (1H, d, J = 16.1Hz, H-7), 6.60 (1H, s, H-6), 6.42 (1H, d, J= 16.1 Hz, H-8), 3.95 (3H, s, 4-OCH₃), 3.86 (3H, s, 5-OCH₃),3.85 (3H, s, 2-OCH₃), 3.81 (3H, s, 9-OCH₃)；¹³C-NMR (100 MHz, CDCl₃) δ:167.6 (C-9), 148.9 (C-5), 142.8 (C-3), 141.7 (C-2), 139.4 (C-7), 138.5 (C-4), 122.5(C-1), 118.0 (C-8), 100.9 (C-6), 61.7 (2-OCH₃), 61.2 (4-OCH₃),56.0 (5-OCH₃), 51.7 (9-OCH₃)。以上数据与文献报道一致^[7]，故鉴定化合物2为3-(3-羟基-2,4,5-三甲氧基苯基)丙烯酸甲酯，即tagalphenylpropanoidin A。

化合物3：白色针晶（二氯甲烷）。易溶于甲醇，能溶于丙酮。(nm): 249, 340；(cm⁻¹): 3 391, 1 699,1 610, 1 514, 1 336, 1 112。HR-ESI-MS m/z: 179.247 4 [M＋H]⁺, 177.068 5 [M－H]^－，表明该化合物的相对分子质量为178，分子式为C₁₀H₁₀O₃。¹H-NMR谱图上显示了9个氢信号，包括1个醛基氢 (δ_H 9.95, 1H, d, J= 7.7 Hz)、3个芳香氢 (δ_H 7.07, 1H, d, J= 1.8 Hz; 7.12, 1H, dd, J = 8.2, 1.8Hz; 6.96, 1H, d, J = 8.2 Hz)、1对双键氢 (δ_H 7.40, 1H,d, J = 15.8 Hz；6.59, 1H, dd, J = 15.8, 7.7 Hz)、1个甲氧基氢 (δ_H 3.95, 3H, s)。¹³C-NMR谱图上显示10个碳信号。根据¹H-NMR、¹³C-NMR数据可知化合物3结构中含有1个苯环、1个双键、1个醛基、1个甲氧基。¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ: 9.95 (1H, d, J = 7.7 Hz,H-1), 6.59 (1H, dd, J = 15.8, 7.7 Hz,H-2), 7.40 (1H, d, J = 15.8 Hz, H-3),7.07 (1H, d, J = 1.8 Hz, H-2′), 6.96(1H, d, J = 8.2 Hz, H-5′), 7.12 (1H, dd,J = 8.2, 1.8 Hz, H-6′), 3.95 (3H, s, 3′-OCH₃)；¹³C-NMR (100 MHz, CDCl₃) δ:193.9 (C-1), 124.3 (C-2), 149.2 (C-3), 126.9 (C-1′), 109.7 (C-2′), 147.2 (C-3′),153.3 (C-4′), 115.2 (C-5′), 126.7 (C-6′), 56.3 (3′-OCH₃)。以上数据与文献报道一致^[8]，故鉴定化合物3为松柏醛。

化合物4：淡黄色油状物，易溶于丙酮、氯仿和甲醇。(nm):221, 264；(cm⁻¹):   3 415, 1 704, 1 630, 1 463,1 114。HR-ESI-MS m/z:193.086 5 [M－H]⁺，表明该化合物的相对分子质量为194，分子式为C₁₁H₁₄O₃。¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ: 6.60 (1H, d, J = 2.2Hz, H-6), 6.44 (1H, d,  J = 2.3 Hz, H-4), 6.27 (1H, dq, J = 16.0, 1.6 Hz, H-1′), 6.13 (1H, dd, J = 15.8, 6.6 Hz, H-2′), 5.69 (1H, s, 1-OH),3.88 (3H, s, 3-OCH₃), 3.87 (3H, s, 2-OCH₃), 1.86 (3H, dd,J = 6.6, 1.6 Hz, -CH₃)；¹³C-NMR (100 MHz, CDCl₃) δ:149.2 (C-1), 134.6 (C-2), 152.3 (C-3), 101.9 (C-4), 134.3 (C-5), 105.4 (C-6), 130.7(C-1′), 125.5 (C-2′), 18.4 (CH₃), 55.8 (3-OCH₃), 61.0 (2-OCH₃)。以上数据与文献报道一致^[9]，故鉴定化合物4为2,3-二甲氧基-5-(1-丙烯基)苯酚。

化合物5：白色固体，易溶于丙酮、氯仿和甲醇。(nm): 221, 278；(cm⁻¹): 3 421,  2 944, 1 700, 1 614, 1 514, 1 340,1 111。HR-ESI-MS m/z: 211.076 6 [M－H]⁻，表明该化合物的相对分子质量为212，分子式为C₁₀H₁₂O₅。¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ:7.32 (2H, s, H-2, 6), 5.95 (brs, 4-OH), 3.93 (6H, s, 3, 5-OCH₃), 3.89(3H, s, COOCH₃)；¹³C-NMR (100 MHz, CDCl₃) δ: 121.2 (C-1), 106.8 (C-2, 6), 146.8 (C-3,5), 139.3 (C-4), 146.8 (C-5), 106.8 (C-6), 167.0 (CO), 56.6 (3, 5-OCH₃),52.2 (COOCH₃)。以上数据与文献报道一致^[10]，故鉴定化合物5为丁香酸甲酯。

化合物6：白色粉末，易溶于丙酮、氯仿和甲醇。(nm): 208, 231, 305；(cm⁻¹):   3 288, 1 672, 1 609, 1 585,1 511, 1 330, 1 105, 829。HR-ESI-MS m/z: 183.069 7 [M＋H]⁺，表明该化合物的相对分子质量为182，分子式为C₉H₁₀O₄。¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ: 9.81 (1H, s, -CHO), 7.15 (2H, s, H-2, 6), 6.09 (1H, s, -OH), 3.96(6H, s, 2×-OCH₃)；¹³C-NMR (100 MHz, CDCl₃) δ:128.5 (C-1), 106.9 (C-2, 6), 147.5 (C-3, 5), 141.0 (C-4), 190.9 (-CHO), 56.6 (3,5-OCH₃)。以上数据与文献报道一致^[11]，故鉴定化合物6为丁香醛。

化合物7：棕色固体，易溶于丙酮、氯仿和甲醇。(nm): 229, 293；(cm⁻¹): 3 426,  1 704, 1 630, 1 463, 1 114, 818, 794, 650。HR-ESI- MS m/z: 225.911 6 [M－H]⁺，表明该化合物的相对分子质量为226，分子式为C₁₅H₁₄O₂。¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ:7.50 (2H, d, J = 7.4 Hz, H-2′, 6′), 7.36(2H, t, J = 7.4 Hz, H-3′, 5′), 7.27 (1H,t, J = 7.4 Hz, H-4′), 7.04 (1H, d, J = 16.3 Hz, H-8), 6.98 (1H, d, J = 16.3 Hz, H-7), 6.65 (1H, s, H-6), 6.61(1H, s, H-2), 6.34 (1H, s, H-4), 3.83 (3H, s, 3-OCH₃)；¹³C-NMR (100 MHz, CDCl₃) δ: 161.1 (C-3), 156.8 (C-5), 139.7 (C-1),137.1 (C-1′), 129.4 (C-8),128.7 (C-3′, 5′), 128.3 (C-7), 127.8 (C-4′), 126.6 (C-2′, 6′), 105.9 (C-2), 105.0(C-6), 100.9 (C-4), 55.4 (3-OCH₃)。以上数据与文献报道一致^[12]，故鉴定化合物7为银松素甲醚。

化合物8：无色片状结晶（丙酮），易溶于氯仿，能溶于丙酮、甲醇。HR-ESI-MS m/z:255.232 9 [M－H]⁻，表明该化合物的相对分子质量为256，分子式为C₁₆H₃₂O₂。¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ: 2.35 (2H, t, J = 7.5Hz, H-2), 1.63 (2H, m, H-3), 1.26 (24H, m, 12×CH₂), 0.87 (3H, t, J = 6.8 Hz, H-16)；¹³C-NMR (100 MHz, CDCl₃) δ:179.6 (C-1), 34.1 (C-2), 32.1 (C-3), 29.9, 29.8, 29.8, 29.8, 29.7, 29.6, 29.5, 29.4,29.2, 29.5 (C-4～13), 24.9 (C-14), 22.9 (C-15), 14.3 (C-16)。以上数据与文献报道一致^[13]，故鉴定化合物8为棕榈酸。

参考文献（略） 

来  源：王亚楠，李敏一. 海南角果木中1个新的苯丙素类化合物 [J]. 中草药, 2019, 50(3):541-545.