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活性氧物种(ROS)是一类具有强反应活性的含氧物质,包括超氧自由基(•O2–)、过氧化氢(H2O2)、羟自由基(•OH)和单线态氧(1O2)等。细胞中ROS的过度产生或紊乱会破坏细胞氧化还原平衡,引起细胞氧化应激,影响正常的生理过程,甚至导致多种疾病。目前,活细胞水平检测ROS的方法主要有荧光法、电化学法和拉曼光谱法等。但是,这些方法很难满足同时检测和准确区分多种不同ROS的需求。因此,发展能够同时检测和区分活细胞中多种不同ROS并原位监测ROS动态变化的方法是一项重大挑战,也是亟待解决的重要问题。
近日,厦门大学的朱志教授提出一种基于表面增强拉曼散射(SERS)借力策略的Au@Pt核壳结构纳米探针。壳层Pt能够吸附多种ROS,并借助内核Au的SERS活性,获得多种ROS的拉曼指纹图谱,同时检测和区分多种不同ROS。通过表面修饰三苯基膦(TPP)分子,Au@Pt-TPP纳米探针能够靶向线粒体,实现原位监测活细胞线粒体中多种不同ROS的动态变化。
作者首先通过原位还原的方法在Au纳米粒子表面沉积了Pt单质,制备Au@Pt核壳结构纳米探针。通过透射电镜、元素成像和紫外可见吸收光谱等表征证明了探针的成功制备。得到的Au@Pt纳米探针能够通过拉曼指纹图谱检测溶液中的H2O2。 接着,作者从人乳腺癌MCF-7细胞中提取线粒体,验证Au@Pt纳米探针通过不同ROS(即•OOH,H2O2, •OH)的拉曼指纹图谱,检测线粒体呼吸产生的ROS的能力。由于这三种ROS中都含有H元素,所以在重水替代实验中,这些ROS的拉曼振动峰都向低波数发生了移动。密度泛函理论计算也进一步证实了Au@Pt纳米探针同时检测和区分不同ROS的能力。 最后,作者通过表面修饰三苯基膦(TPP)分子,将Au@Pt-TPP纳米探针靶向到线粒体,用于原位监测MCF-7细胞受到佛波酯PMA刺激和抗氧化剂二甲基硫脲(•OH清除剂)处理等条件下,线粒体ROS的动态变化。 该工作首次提出基于SERS借力策略的Au@Pt纳米探针用于活细胞线粒体中多种不同ROS的同时原位监测,为揭示细胞中ROS的动态变化过程和不同ROS各自发挥的作用提供了一种全新的研究工具。 论文信息 Direct and Simultaneous Identification of Multiple Mitochondrial Reactive Oxygen Species in Living Cells Using a SERS Borrowing Strategy Shichao Lin,# Huajie Ze,# Xia-Guang Zhang, Yue-Jiao Zhang, Juan Song, Huimin Zhang, Han-Liang Zhong, Zhi-Lan Yang, Chaoyong Yang, Jian-Feng Li, and Zhi Zhu* 文章的第一作者是厦门大学博士后林世超和博士生泽花姐。 Angewandte Chemie International Edition DOI: 10.1002/anie.202203511




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