过氧亚硝酰（ONOO^-）是生物体内最重要的活性氧之一，易与生物分子如核酸、蛋白质等发生氧化和硝化反应，与许多临床疾病如癌症、阿耳茨海默氏病等密切相关。因此，揭示ONOO^-的生物学功能将有助于了解相关疾病的发病机制。在生理条件下，ONOO^-具有寿命短、反应活性高、浓度低等特点，使得发展高灵敏、高选择性的ONOO^-检测方法一直是困扰研究者的难点问题。近年来，基于荧光探针的荧光成像技术因其高时空分辨率、高灵敏度和非侵入性等优点，已成为研究ONOO^-生理功能的理想工具。

近日，海南医学院刘恒、于法标教授团队开发了一种用于原位检测ONOO^-的线粒体-内质网双靶向红光荧光探针MCSA。探针MCSA由二氢萘酚/吲哚盐组成，其分子骨架中的D-π-A共轭结构赋予了MCSA红光发射能力，吲哚盐增强了MCSA的水溶性并使其具有线粒体靶向能力，N-(2-氨基乙基)-4-甲基苯磺酰胺使MCSA具有靶向内质网的能力（图1）。研究证明MCSA可以特异性检测ONOO^-而不受到其它氧化还原物种等的干扰，在0 - 18 μM的ONOO^-浓度范围内，荧光强度与浓度呈现良好的线性关系。在生物成像研究中，MCSA表现出很好的成像能力，不仅能实现对三种不同细胞系和斑马鱼中ONOO^-成像，而且可示踪衣霉素诱导内质网应激过程中ONOO^-的浓度变化。共定位实验结果表明MCSA可选择性定位于线粒体和内质网，皮尔逊系数分别为0.94和0.83。这项工作提供了一种有用的工具来研究生物体内ONOO^-的化学生物学。